紫外可見分光光度計與熒光、可見分光光度計3者的區(qū)別,別再混淆了

　　在生物實驗中，常常看到紫外可見分光光度計、可見分光光度計、熒光分光光度計。很多人下意識認為它們可能是一種東西，其實不然，它們之間的區(qū)別還是蠻大的，一起來了解下吧。

　　首先我們來了解下紫外可見分光光度計與可見分光光度計與的區(qū)別

　　1、儀器分析的波長范圍不一樣，紫外可見分光光度計的波長范圍是：200nm-1000nm，其中200nm-330nm標定為紫外光譜，330nm-800nm標定為可見光譜，800nm-1000nm標定為近紅外光譜。

　　而可見分光光度計的波長范圍只在可見光譜區(qū)內(nèi)330nm-800nm。

　　2、儀器分析物質(zhì)也不一樣，紫外光譜大都分析有機物，可見光譜大都分析無機物，當然也不是絕對的，只是大部分有機物的吸收敏感點在紫外光譜區(qū)，無機物的吸收敏感點在可見光譜區(qū)。

　　3、在使用的光源有所不一，在目前國內(nèi)外的分光光度計中，大部分紫外光源用的是氘燈，可見光源用的是鎢燈，紫外燈源的價格相對可見燈源的價格要高很多，當然也有一些用氙燈替代氘燈和鎢燈，其價格更高。

　　4、儀器結(jié)構(gòu)設(shè)計不一樣，紫外可見分光光度計要求儀器的體積相對可見分光光度計要大一些，這其中除了考慮多了一個燈的擺放位置，還要考慮到燈的散熱。

　　5、還有儀器其它的一些不一樣的，例如：電路設(shè)計原理、色散元件、光電轉(zhuǎn)換元器件等。

　　6、可見分光光度計一般使用玻璃比色皿即可，而紫外可見分光光度計的紫外區(qū)段需使用石英比色皿（最好是黑色石英比色皿，可以遮擋雜光）。

　　7、2者亦可以使用全波段酶標儀代替。

　　然后我們再來說說紫外可見分光光度計與熒光分光光度計的區(qū)別

　　1、原理不一樣。熒光分光光度計由高壓汞燈或氙燈發(fā)出的紫外光和藍紫光經(jīng)濾光片照射到樣品池中，激發(fā)樣品中的熒光物質(zhì)發(fā)出熒光，熒光經(jīng)過濾過和反射后，被光電倍增管所接受，然后以圖或數(shù)字的形式顯示出來。紫外分光光度計是根據(jù)朗伯-比耳定律(Lambert－Beer)光吸收的基本定律，即物質(zhì)中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長的光能量。通俗的說，熒光分光光度計是測樣品中物質(zhì)被激發(fā)出了光能量，紫外分光光度計是測樣品中物質(zhì)吸收了光能量，原理完全不同。

　　2、光源不一樣。紫外可見分光光度計在紫外區(qū)使用氫燈或氘燈,在可見光區(qū)使用氘燈或溴鎢燈.它們發(fā)出的都是連續(xù)光譜,通過三棱鏡（中檔）、光柵（高檔）、濾光片（低級）等分光,這樣兩種燈組合基本涵蓋了紫外-可見光的波長范圍. 熒光分光光度計由氙弧燈發(fā)出的光通過切光器使其變成斷續(xù)之光以及激發(fā)光單色器變成單色光后,此光即為熒光物質(zhì)的激發(fā)光,被測的熒光物質(zhì)在激發(fā)光照射下所發(fā)出的熒光,經(jīng)過單色器變成單色熒光后照射于測樣品用的光電倍增管上.

　　3、儀器結(jié)構(gòu)不一樣。熒光分光光度計的光源和檢測器是成直角分布的,而紫外是成一條直線的.

　　4、儀器分析的物質(zhì)不一樣。紫外-可見分光光度計可用于大部分有色物質(zhì)的定量監(jiān)測,通常需要使用各種各樣的顯色劑；熒光分光光度計可用于測試發(fā)光材料的發(fā)射光譜、激發(fā)光譜、時間掃描,不需要顯色劑,靈敏度比紫外-可見分光光度計高2－3個數(shù)量級.

　　5、熒光分光光度計的比色皿是四壁均為光學(xué)面,而紫外僅兩面為光學(xué)面.